Các tiêu chuẩn để xử lý điện di là gì?

Các tiêu chuẩn để xử lý điện di là gì?

Nguyên lý cơ bản của điện di là nó đề cập đến quá trình các hạt tích điện di chuyển dưới tác dụng của điện trường. Nhiều phân tử sinh học quan trọng, chẳng hạn như axit amin, peptide, protein, nucleotide, axit nucleic, v.v., có các nhóm ion hóa có thể mang điện tích dương hoặc âm ở một giá trị pH cụ thể. Dưới tác dụng của điện trường, các phân tử tích điện này sẽ chuyển động về hướng điện cực ngược với cực tính của điện tích của chúng.

Kỹ năng điện di là khả năng phân tách, xác định hoặc tinh chế mẫu bằng cách sử dụng điện trường, khiến các phân tử tích điện chuyển động với tốc độ khác nhau do sự khác biệt về tính chất tích điện của các phân tử khác nhau trong mẫu được phân tách, cũng như sự khác biệt. về kích thước, hình dạng và các tính chất khác của chính các phân tử. Quá trình điện di cần được thực hiện trong môi trường hỗ trợ. Điện di giao diện miễn phí được thực hiện bởi Tiselius et al. năm 1937 chưa có môi trường hỗ trợ cố định nên độ phân tán và đối lưu tương đối mạnh, ảnh hưởng đến hiệu ứng phân tách. Vì vậy, nó trình bày điện di với môi trường hỗ trợ cố định, trong đó mẫu trải qua quá trình điện di trong môi trường cố định, làm giảm sự can thiệp của sự phân tán và đối lưu.

Các phương tiện hỗ trợ ban đầu là giấy lọc và màng cellulose axetat, hiện nay ít được sử dụng phổ biến trong các phòng thí nghiệm. Trong một thời gian dài, các chất phân tử nhỏ như axit amin, peptide, đường, v.v. thường được phân tách và phân tích bằng phương pháp điện di sử dụng giấy lọc hoặc các tấm lớp mỏng cellulose hoặc silica gel làm môi trường. Tuy nhiên, hiện nay, các kỹ thuật tích cực hơn như HPLC thường được sử dụng để phân tích. Các phương tiện này thích hợp để tách các chất phân tử nhỏ, thao tác đơn giản và thuận tiện. Tuy nhiên, hiệu quả tách các phân tử sinh học bị rối loạn là tương đối kém. Việc đưa gel làm môi trường hỗ trợ đã thúc đẩy đáng kể sự phát triển kỹ năng điện di, khiến kỹ năng điện di trở thành một trong những kỹ thuật quan trọng để phân tích các đại phân tử sinh học như protein và axit nucleic.

Xử lý điện di không khó nhưng chúng ta cũng cần biết rằng xử lý điện di có những tiêu chuẩn nhất định, nếu không thì không biết chất lượng có đạt yêu cầu hay không. Vậy tiêu chuẩn cho quá trình điện di này là gì?

1. Bề mặt nhẵn

Đây là điều kiện cơ bản, nếu bề mặt không nhẵn thì mất đi tính chất cơ bản;

2. Độ dày đồng đều

Quá trình xử lý điện di đòi hỏi phải đảm bảo độ dày đồng đều để tránh xuất hiện sự khác biệt về màu sắc;

3. Không có vết nứt rõ ràng trên bề mặt